ПАРТОШУЪР ТЕСТ ЗА ПРЕЖДЕВРЕМЕННО РАЖДАНЕ

ПАРТОШУЪР ТЕСТ ЗА ПРЕЖДЕВРЕМЕННО РАЖДАНЕ

Указания за диагностична употреба Ин Витро

Предназначение:

Тестът ПартоШуър e бърз неинструментален, качествен имунохроматографски тест за in vitro откриване на плацентарен алфа микроглобулин-1 (PAMG-1) във вагиналния секрет на бременни жени. Изделието е предназначено като помощно средство за бързо оценяване на риска от преждевременно раждане в ≤ 7 или ≤ 14 дни от момента на вземане на цервико-вагиналната проба при бременни жени с признаци и симптоми на ранно преждевременно раждане, интактна амниотична мембрана и минимална дилатация (≤ 3 см), взета между 20 седмица, 0 дни и 36 седмица, 6 дни от бременността.

Обобщение и обяснение на теста:

Точната оценка на риска от преждевременното раждане е клинично значима при бременности, застрашени от преждевременно раждане. Това е особено вярно с оглед прилагането на кортикостероиди, кои то имат оптимална полза в рамките на 7 дни от приложението им¹, както и превеждането на пациентките в специализиран център за проследяване и грижа за преждевременно родени деца. Само клиничният преглед, включващ измерване на цервикалната дължина и дилатация, не е достатъчно предиктивен за предстоящо раждане².
Също така наличните тестове за биомаркери като тези, базирани на откриването на феталния фибронектин, имат изключително слаба предиктивна стойност за предстоящо раждане³. Ето защо точното предвиждане на времето до раждане при пациентки, застрашени от преждевременно прекъсване на бременността, остава важен клиничен проблем. Тестът ПартоШуър е бърз, неинвазивен тест с висока предиктивна стойност за раждане в рамките на 7 дни при пациентки с изявени белези и симптоми на преждевременно раждане. Високите негативни и позитивни предиктивни стойности на теста ПартоШуър тест позволяват навременното откриване на пациентките, които биха имали полза от наличните процедури като антенатални кортикостероиди. В допълнение, по-точното откриване на тези пациентки ще допринесе за намаляване на разходите, свързани с ненужното хоспитализиране, следствие на слабо позитивните предиктивни стойности на методи, използвани досега. Тестът е самостоятелна система, която предоставя бързи, качествени резултати без външен инструментариум или инвазивен преглед със спекулум.

Принцип на теста:

Тестът ПартоШуър е имунохроматографски анализ с латерален поток, предназначен да идентифицира наличието на човешки плацентен алфа-микроглобулин-1 (PAMG-1), които се открива в цервико-вагиналния ексудат при предстоящо раждане. Тестът използва моноклонални антитела, достатъчно чувствителни да открият 1 ng/ml от PAMG-1. Протеинът PAMG-1 се освобождава от децидуалните клетки в амниотичната кухина през цялата бременност и е наличен в цервико-вагиналния секрет, когато предстои непосредствено раждане. Това вероятно се дължи на трансудацията на протеина през съществуващи пори в хориоамниотичните мембрани по време на маточните контракции и на потенциална деградация на екстрацелуларния матрикс на феталните мембрани, дължаща се на възпалителен процес от раждането или инфекция. Наличието му в цервико-вагиналния секрет е индикатор, че вероятно предстои раждане в рамките на 7 дни и може да бъде свързано със значително повишен риск от вътрешна амниотична инфекция и/или възпаление. Отсъствието му показва, че е малко вероятно да предстои раждане в рамките на 7 или 14 дни. За анализа се екстрахира в разтворител проба от цервико-вагиналния секрет, взета чрез вагинален тампон. След това присъствието на PAMG-1 антигена се открива чрез поставяне на тест лента за латерален поток във флакона. Пробата се придвижва от абсорбиращата подложка към нитроцелулозната мембрана, преминавайки през реактивна зона, съдържаща моноклонални анти-PAMG-1 антитела, конюгирани към златни частици. Комплексът антиген-антитяло се придвижва към тестовия участък, където се имобилизира от второ анти-PAMG-1 антитяло. Това събитие до появяване на тест линията. Несвързаните комплекси антиген-антитяло продължават движението си по тест лентата и биват имобилизирани от второ антитяло. Това води до появата на вътрешна контролна линия.

Реагенти и компоненти:

В комплекта на теста ПартоШуър са включени следните компоненти: ПартоШуър тест лента в опаковка от алуминиево фолио с подсушител, стерилен вагинален памучен тампон и пластмасов флакон с екстрахиращ разтвор (0,9% NaCl, 0,05% NaN3, 0,01% Triton X 100).

Предупреждения и предпазни мерки:

Тестът ПартоШуър е само за ин витро диагностика и никаква част от него не трябва да се приема вътрешно.
Инструкциите за употреба трябва да се спазват точно; неспазването на това може да доведе до нежелани резултати.
При събиране, манипулиране и изхвърляне на тестовите проби трябва да се спазват мерки за безопасност.
Употребата на каквито и да е тампони, различни от стерилния памучен тампон, включен в тестовия комплект, ще промени резултата, поради което е строго забранено.
Не използвайте увредени компоненти на тестовия комплект.
Използваните тестове са биологически опасни и при изхвърляне на компонентите на теста трябва да се вземат необходимите предохранителни мерки.
Не използвайте след изтичане на срока на годност, който е означен на опаковката.
Компонентите на теста са само за еднократна употреба.
Не извивайте и не прегъвайте тест лентата или торбичката от алуминиево фолио с тест лентата в нея; това може да повреди лентата и да доведе до неточни резултати.

Съхранение и стабилност:

Съхранявайте теста ПартоШуър на сухо при 4 до 25°C (40 до 77°F). Тестът не трябва да се замразява. При съхранение в торбичката от фолио при препоръчаната температура тестът е стабилен до изтичане на срока на годност отпечатан върху торбичката. Тест лентата ПартоШуър трябва да бъде използвана в рамките на 4 часа след изваждане на тест лентата от фолиевата торбичка.

Качествен контрол:

Тест лентата на ПартоШуър съдържа механизъм за вътрешен контрол, който гарантира функционалността на аналитичната част на теста.

Процедура на теста:

• Хванете флакона с разтворителя за капачката и се уверете, че цялото количество течност в него е паднало на дъното. Отворете флакона и го поставете във вертикално положение.
• За да вземете проба от вагината, използвайте само стерилния памучен тампон, предоставен с комплекта за тест ПартоШуър. Извадете тампона от опаковката, следвайки инструкциите върху опаковката. Върхът на тампона не трябва да докосва нищо преди поставянето му във вагината. Дръжте тампона по средата на държача и, докато пациентката е в легнало положение по гръб, внимателно вмъкнете върха на тампона докато пръстите ви се допрат до кожата (не повече от 5-7 см. дълбочина). Изтеглете тампона от вагината след 30 секунди.
• След като извадите тампона от вагината, веднага поставете върха в предоставения флакон с разтворител и изплакнете, като го въртите около оста му за 30 секунди.
• Извадете тампона от флакона и го изхвърлете.
• Отворете торбичката от алуминиево фолио, като скъсате на предназначените за целта прорези, и извадете тест лентата на ПартоШуър.
• Поставете белият край на тест лентата (маркиран със сочещи надолу стрелки) във флакона с разтворител.
• Извадете тест лентата от флакона, ако в тестовата зона се виждат отчетливо две линии или след точно 5 минути. Отчетете резултата, като поставите тест лентата върху чиста, бяла, суха повърхност. Позитивен резултат се отчита при две линии в тестовата зона, а негативен резултат се отчита при една линия в тестовата зона. Не отчитайте и не интерпретирайте резултатите, след като са минали 10 минути от поставянето на тест лентата във флакона.
• Позитивен: две червени линии Негативен: една червена контролна линия Невалиден: няма червени линии
• Предстоящо раждане до 7 дни е много вероятно Предстоящо раждане в рамките на 7-14 дни е малко вероятно Резултатът е невалиден, направете друг тест
• Интензивността на линиите може да варира; резултатът от теста е валиден, дори и ако линиите са бледи или неравни. Не интерпретирайте резултатите от теста само на основа на интензивността на линиите. Не отчитайте или интерпретирайте резултатите, след като са минали 10 минути от поставяне на тест лентата във флакона.
• Появата на една или две линии в зоната за резултати на тест лентата удостоверява целостта на компонентите и процедурата на теста.

Ограничения на теста:

Резултатите от теста ПартоШуър са качествени, а не количествени. Не трябва да се правят количествени интерпретации въз основа на интензивността на тестовите или контролните линии. При наличие само на следи от кръв на тампона, тестът функционира правилно. Когато има значително количество кръв върху тампона тестът може да не функционира правилно и не се препоръчва отчитане на резултата. Тестът ПартоШуър не трябва да се използва по-рано от 6 часа след премахване на всякакви разтвори или лекарствени продукти от вагината. Резултатите трябва да се използват в комбинация с друга клинична информация. Резултати от теста при пациентки без признаци и симптоми за раждане са неизвестни. Плацента превия (Placenta previa) и извършването на мануални прегледи преди вземане на проби могат да доведат до неточни тестови резултати. След вземане пробата е стабилна до 8 часа на стайна температура.

Очаквани стойности:

Тестът ПартоШуър открива следи от човешки PAMG-1. Концентрация на PAMG-1 над 1 ng/ml показва повишен риск от раждане през следващите 7 дни. Чувствителността на теста при 1 ng/ml е валидирана в международно многоцентрово клинично изпитване за оценка на връзката между присъствието на PAMG-1 в цервико-вагиналните секреции и времевия интервал от теста до раждането.

Функционални характеристики:

Клиничната функционалност на теста ПартоШуър е установена в между народно многоцентрово проучване. В изпитването са били поканени да участват пациентки, които (i) са съобщили за признаци симптоми или оплаквания, предполагащи преждевременно раждане, (ii) са били между 20 и 36^67 гестационна седмица и (iii) са имали клинично интактни мембрани. Общо 203 пациентки са включени в крайния анализ. Изчислени са очаквани функционални резултати със съответни доверителни интервали (ДИ) от 95%:

*95% доверителен интервал (ДИ) е изчислен по процедура на Clopper-Pearson Nikolova T, Bayev C, Nikolava N, Di Renzo GC Comparison of a novel test for placental alpha microglobulin-1 with fetal fibronectin and cervical length measurement for the prediction of imminent spontaneous preterm delivery in patients with threatened preterm labor. J Perinat Med. 2015 Jan 6.

Кръстосана реактивност:

Следните протеини са изследвани за кръстосана реактивност с моноклоналните антитела, използвани в теста ПартоШуър: алфа-2-микроглобулин при бременност, човешки хорионгонадотропин, трофобластен бета-1-гликопротеин, човешки плацентарен лакто-ген, алфа-фетопротеин, човешки серумен албумин и няколко инсулиноподобни, свързващи растежни фактори (insulin-like growth factor binding protein, IGFBR) протеини. Анализираните моноклонални антитела, използвани в ПартоШуър, не са показали кръстоса реактивност с тези протеини. Антитялото, използвано в тестова линия, е показало кръстосана реактивност към IGFBP-3 протеин при използване на метода enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA. Концентрацията на IGFBF във вагинален секрет при бременни обаче не оказва въздействие върху точността на теста ПартоШуър.

Проучвания за съвместимост:

Вагинални инфекции, урина, сперма, както и следи от кръв, не пречат резултатите от ПартоШуър. Тези субстанции и състояния са изследвани в не клинични проучвания и е установено наличието на PAMG-1 в тях, в концентрации под прага на чувствителност на ПартоШуър.

Производител:

QIAGEN, САЩ